基于以上，来自南方医科大学南方医院肾内科的周丽丽/李晓龙团队于2026年2月在Kidney International杂志上发表了题为“Increased Smoothened signaling promotes kidney fibrosis through inhibiting autophagy in fibroblasts”的文章，该研究揭示肾脏成纤维细胞的Smoothened（Smo）信号在抑制细胞自噬、驱动CKD肾脏纤维化进程中的关键作用。该研究不仅为理解肾脏纤维化的演进机制提供了全新视角，也为慢性肾脏病的临床干预开辟了潜在的新靶点。

首先，研究人员通过分析人类肾脏snRNA-seq数据，将成纤维细胞划分为七个功能亚群，并发现：与健康对照组相比，在CKD样本中，Smo在皮质成纤维细胞多个亚群［FIB、dFIB（早期肌成纤维细胞）和aFIB（肌成纤维细胞潜在祖细胞）］中表达显著升高，在肌成纤维细胞（MYO）和髓质纤维细胞（M-FIB）中也有所增加，而在基质和ECM评分较低的髓质退化纤维细胞亚群（dM-FIB）中则表达下降。进一步在多种CKD模型及原代细胞中证实，Smo高表达的成纤维细胞呈现肌成纤维细胞活化表型，同时伴随自噬流受阻及自噬诱导反应性丧失。这些结果表明，Smo的高表达与成纤维细胞活化及细胞外基质产生密切相关，提示其在肾脏纤维化进程中可能发挥关键作用。（图1）

图1 Smo在活化肾成纤维细胞中上调，并与自噬能力缺陷相关

随后，研究人员通过分离原代成纤维细胞以及NRK-49F成纤维细胞系揭示：Shh刺激可上调Smo及纤连蛋白表达、促进细胞增殖，同时抑制自噬流并诱导SQSTM1积累；而使用Smo特异性拮抗剂NVP-LDE225或自噬诱导剂雷帕霉素则可逆转上述效应，抑制肌成纤维细胞活化。在ATG5敲除的成纤维细胞中，Shh对自噬的抑制作用及对肌成纤维细胞活化的促进作用进一步增强，而过表达ATG5则抵抗Shh的效应。这些结果表明，Shh/Smo信号通过抑制自噬驱动成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，从而参与肾脏纤维化进程。（图2）

图2 Shh/Smo信号通过抑制自噬促进成纤维细胞活化

接下来，通过构建成纤维细胞特异性Smo敲除小鼠（Smo^CKO）并实施UUO手术，研究人员发现：与对照组相比，Smo^CKO小鼠来源的原代肾成纤维细胞中p-mTOR和SQSTM1表达下调，ATG5和LC3BII形成增加，自噬空泡增多，自噬能力得以恢复；同时，这些细胞的肌成纤维细胞活化标志物表达降低，增殖能力减弱，肾间质基质沉积和纤维化病变明显减轻。这些结果表明，成纤维细胞中的Smo通过抑制自噬促进肌成纤维细胞活化，从而驱动肾脏纤维化进展。（图3）

图3 特异性敲除成纤维细胞Smo可增强自噬并缓解肾纤维化

接下来，研究人员通过整合人类肾脏snRNA-seq数据分析及原代成纤维细胞GSEA验证，发现Smo正向调控细胞外基质形成、非经典Wnt信号及mTOR通路，同时抑制自噬；进一步机制研究表明，Smo通过β-arrestin 1/Src复合物促进β-catenin活化入核，而使用β-catenin降解剂KYA1797K或干扰β-arrestin 1可抑制p-mTOR、恢复自噬流并阻抑肌成纤维细胞活化。这些结果表明，Smo主要通过β-arrestin 1/Src/β-catenin调控成纤维细胞自噬与活化。（图4）

图4 Smo通过激活β-arrestin 1/Src/β-catenin途径抑制成纤维细胞的自噬

随后，生信预测与实验验证显示，β-catenin核效应分子TCF/LEF可直接结合 mTOR 启动子，Smo与β-catenin过表达可协同上调mTOR转录及蛋白磷酸化，而β-catenin降解剂KYA1797K可阻断这一过程。功能实验表明，β-catenin过表达通过激活mTOR抑制自噬流，雷帕霉素可逆转该效应并减轻肌成纤维细胞活化与基质沉积。上述结果揭示 Smo/β-catenin/TCF-LEF轴通过转录上调mTOR、抑制成纤维细胞自噬，进而驱动肾脏纤维化的新机制。（图5）

图5 Smo/β-catenin/ mTOR信号轴介导自噬缺陷，进而驱动肌成纤维细胞转化

随后，研究人员构建成纤维细胞特异性β-catenin敲除小鼠（β-cat^CKO）并进行 UUO 手术，发现敲β-cat^CKO小鼠肾间质纤维细胞β-catenin表达被有效抑制，肌成纤维细胞活化与肾间质纤维化显著减轻，相关纤维化标志物表达明显下调，提示成纤维细胞中β-catenin对肌成纤维细胞活化及肾脏纤维化至关重要。进一步单细胞测序及机制分析显示，β-catenin敲除可降低成纤维细胞与肌成纤维细胞比例、下调促纤维化通路，并通过抑制mTOR信号恢复细胞自噬，改变成纤维细胞分化轨迹，使其偏向肾脏结构修复，表明β-catenin可通过抑制自噬促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，进而驱动肾脏纤维化。（图6）

图6 成纤维细胞中敲除β-catenin可预防肾纤维化

最后，通过在已建立的UUO小鼠模型中给予Smo拮抗剂NVP-LDE225治疗，研究人员发现：NVP-LDE225可有效抑制肾间质成纤维细胞中Smo及活性β-catenin的表达，降低纤维细胞增殖；同时，该处理显著增强了成纤维细胞的自噬能力，表现为p-mTOR和SQSTM1表达下调、LC3B斑点增多、自噬空泡增加。RNA-seq及GSEA分析进一步证实，NVP-LDE225处理抑制了Hedgehog信号及非经典Wnt通路。这些结果表明，靶向Smo可通过抑制β-catenin、恢复自噬功能来阻断肌成纤维细胞活化，在已建立的纤维化模型中仍具有治疗潜力。（图7）

图7 NVP-LDE225显著改善UUO小鼠的肾纤维化

来源：KidneyCode