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多房棘球蚴源性外泌体对巨噬细胞极化的影响

2023-06-21作者：临床肝胆病杂志资讯

目的

探究不同时间及浓度多房棘球蚴源性外泌体对巨噬细胞极化的影响。

方法

从60只造模BALB/c小鼠中随机选取4只，应用7.0T MRI观察腹腔病灶生长情况；解剖造模小鼠，通过腹腔病灶提取原头节进行体外培养，超速离心法从培养上清中提取外泌体，透射电镜及蛋白质免疫印迹法鉴定外泌体表征。将未加外泌体处理的巨噬细胞单独培养组设为对照组，不同浓度多房棘球蚴来源外泌体与巨噬细胞共培养组设为实验组(10 μg/mL组、50 μg/mL组)，分别共培养48 h和72 h，显微镜下观察巨噬细胞形态变化。通过流式细胞术和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测极化状态。符合正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。

结果

7.0T MRI显示小鼠腹腔内弥漫分布、大小不等的病灶形成；多房棘球蚴源性外泌体直径100 nm左右，呈杯型或茶托型，其表面标志物CD9、TSG101和CD63表达阳性。共培养后，实验组大部分细胞拉长，形态不规则，主要呈多角形；流式细胞术检测发现，共培养48 h，对照组CD16/32、CD206、CD369阳性率分别为(99.53±0.06)%、(90.27±0.21)%、(2.40±0.20)%；与对照组相比，除10 μg/mL外泌体组CD369阳性率[(0.80±0.00)%]降低(P＜0.05)，其余组别CD16/32、CD206、CD369阳性率均明显升高(P值均＜0.000 1)；共培养72 h，对照组CD16/32、CD206、CD369阳性率分别为(99.67±0.06)%、(85.47±0.55)%、(6.60±0.20)%，实验组CD16/32、CD206、CD369阳性率较对照组均明显升高(P值均＜0.05)。ELISA结果示：共培养48 h，对照组IL-6及TNFα水平分别为(58.53±15.52) pg/mL、(320.70±5.30)pg/mL，实验组外泌体浓度为50 μg/mL时IL-6[(98.81±15.55) pg/mL]较对照组升高(P＜0.05)；共培养72 h，对照组IL-6及TNFα水平分别为(76.22±9.68)pg/mL、(323.90±87.37)pg/mL，当外泌体浓度为10 μg/mL时TNFα水平[(164.20±14.17)pg/mL]较对照组明显下降(P＜0.05)；当外泌体浓度为50 μg/mL时IL-6水平[(99.52±8.35)pg/mL]较对照组升高(P＜0.05)。

结论

多房棘球蚴源性外泌体可调控巨噬细胞极化，且在浓度为10 μg/mL，共培养72 h后，可导致巨噬细胞M2样极化，具体方式有待进一步研究。

冶赓博, 陈功富, 崔紫烟, 等. 多房棘球蚴源性外泌体对巨噬细胞极化的影响[J]. 临床肝胆病杂志, 2023, 39(4): 876-884. DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2023.04.019.

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